ATP生物熒光檢測(cè)儀的工作原理是基于螢火蟲發(fā)光的生物化學(xué)反應(yīng),具體過(guò)程如下:
熒光素-熒光素酶反應(yīng)體系:ATP生物熒光檢測(cè)儀利用了熒光素-熒光素酶這一生物發(fā)光體系。熒光素是一種在生物體內(nèi)能發(fā)光的物質(zhì),而熒光素酶是一種可以催化熒光素發(fā)光反應(yīng)的酶。在有氧條件下,熒光素酶能夠催化熒光素與ATP發(fā)生反應(yīng)。
能量轉(zhuǎn)移與發(fā)光:當(dāng)熒光素與ATP結(jié)合后,會(huì)發(fā)生一系列的化學(xué)反應(yīng),形成一種激活態(tài)的熒光素-酶-底物復(fù)合物。在復(fù)合物回到基態(tài)的過(guò)程中,會(huì)釋放出能量,這種能量以光子的形式釋放,從而產(chǎn)生熒光。
檢測(cè)與量化:ATP生物熒光檢測(cè)儀內(nèi)部配備有高靈敏度的光電檢測(cè)裝置,如光電倍增管或電荷耦合器件(CCD)。這些裝置能夠捕捉到熒光素發(fā)光產(chǎn)生的微弱熒光信號(hào),并將其轉(zhuǎn)化為電信號(hào)進(jìn)行放大和處理。儀器通過(guò)對(duì)熒光信號(hào)的強(qiáng)度進(jìn)行測(cè)量和分析,進(jìn)而計(jì)算出樣品中ATP的含量。由于ATP是所有活細(xì)胞中都含有的一種能量物質(zhì),其含量與細(xì)胞數(shù)量在一定范圍內(nèi)呈正相關(guān),所以通過(guò)檢測(cè)ATP含量就可以間接反映出樣品中的微生物數(shù)量或生物殘留量。
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